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—— 中国食品杂志社
本研究实现了脱氧雪腐镰刀菌烯醇解毒酶DepB在枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）RIK 1285中的异源表达，但DepB较低的发酵水平限制了其在食品加工和饲料中的应用，可采用转录和翻译相结合的策略提高DepB在枯草芽孢杆菌中的表达水平。首先，选择9 个单启动子替换原始启动子P43，其中单启动子PspoVG介导的重组菌经发酵后酶活力最高，酶活力为29.59 U/mL。其次，选择4 个具有较高DepB表达水平的启动子（P43、PsacB、PspoVG和PaprE）构建16 个双启动子系统，其中，DepB在双启动子PaprE-PspoVG的介导下活力达到最高，为48.87 U/mL。此外，通过对启动子PaprE-PspoVG的核心区域（-35和-10区）进行优化，Mutant-5酶活力高达69.17 U/mL，是原始菌株（14.45 U/mL）的4.79 倍。在此基础上，通过优化启动子PspoVG的核糖体结合位点序列，进一步提高了DepB的表达水平，RBS15酶活力为115.15 U/mL，是原始菌株的7.97 倍。研究结果表明，转录和翻译相结合策略是提高重组蛋白发酵水平的有效手段。
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