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—— 中国食品杂志社
探讨青蛤多肽的制备工艺及体外抗前列腺癌DU-145细胞的活性。以氨基氮含量为检测指标，筛选最优酶种类并进行正交试验以获取最佳酶解青蛤内脏酶解工艺。经超滤截留、琼脂糖凝胶层析、高效液相色谱分离纯化及噻唑蓝（3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide，MTT）活性筛选得到含有5 个氨基酸的多肽（Ile-Leu-Tyr-Met-Pro）。对所得多肽采用MTT法测定DU-145细胞增殖抑制率；采用倒置显微镜、Hoechst 33258染色及透射电子显微镜技术观察细胞形态学变化；采用荧光法检测细胞内活性氧（reactive oxygen species，ROS）水平；采用线粒体膜电位检测DU-145细胞凋亡情况；采用免疫组织化学法检测非转移性克隆23型（nm23H1）蛋白的表达。结果表明：制备青蛤多肽最佳酶是木瓜蛋白酶，最佳酶解条件是料液比1:4、pH 7.0、加酶量1 500 U/g、温度45.0 ℃、酶解时间4 h；所得多肽对DU-145细胞的增殖具有明显的抑制作用，且呈时间与剂量依赖性；处理后的DU-145细胞出现凋亡的形态学特征；其质量浓度和细胞内ROS的表达量呈正相关关系；线粒体膜电位降低率从4.22%提高到25.07%；免疫组织化学法结果显示nm23H1蛋白的表达量增加。青蛤多肽能明显抑制DU-145细胞的增殖，并通过诱导其发生凋亡而发挥作用。
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