领学术科研之先，创食品科技之新
—— 中国食品杂志社
为了提高植酸酶的活性和热稳定性，增加其在食品加工领域的应用潜力，对植酸酶YiAPPA进行同源模建，结合蛋白质分子表面氨基酸突变策略，选择位于分子表面的赖氨酸和甘氨酸进行定点突变，构建单位点突变体。通过活性和热稳定性筛选，获得活性和热稳定性显著提高的突变体K216R以及热稳定性提高的突变体K189R。通过有益突变位点叠加策略，进一步构建并表征组合突变体K189R/K216R的酶活力及热稳定性。结果表明：与YiAPPA相比，K189R/K216R于80 ℃半衰期由14.81 min延长至23.35 min，半失活温度由55.12 ℃提升至62.44 ℃，热解折叠温度由48.36 ℃提升至53.18 ℃。并且K189R/K216R于37 ℃、pH 4.5的酶活力由3 959.98 U/mg提高至4 469.13 U/mg。分子结构建模和分子动力学模拟的结果显示：K189R/K216R中引入了新的氢键，能够提高酶部分结构单元的稳定性，使其热稳定性得到提高；同时K189R/K216R的催化口袋体积增大是其活性提高的主要原因。本研究通过蛋白质分子表面氨基酸突变策略可有效提高植酸酶YiAPPA的活性和热稳定性，为植酸酶及其他类型酶的分子改造提供参考依据。
2023年第44卷 2022年第43卷 2021年第42卷 2020年第41卷 2019年第40卷 2018年第39卷 2017年第38卷 2016年第37卷 2015年第36卷 2014年第35卷 2013年第34卷 2012年第33卷 2011年第32卷 2010年第31卷 2009年第30卷 2008年第29卷 2007年第28卷 2006年第27卷 2005年第26卷 2004年第25卷 2003年第24卷 2002年第23卷 2001年第22卷 2000年第21卷 1999年第20卷 1998年第19卷 1997年第18卷 1996年第17卷 1995年第16卷 1994年第15卷 1993年第14卷 1992年第13卷 1991年第12卷 1990年第11卷 1989年第10卷 1988年第09卷 1987年第08卷 1986年第07卷 1985年第06卷 1984年第05卷 1983年第04卷 1982年第03卷 1981年第02卷 1980年第01卷
电话: 010-87293157
地址: 北京市丰台区洋桥70号
版权所有 @ 2023 中国食品杂志社 京公网安备11010602060050号 京ICP备14033398号-2
