目的:明确酪蛋白源肽TPTLN的助睡眠作用并探究其可能的作用机制。方法:将30 只小鼠平均分成3 组,实验组灌胃酪蛋白源肽TPTLN(剂量为5 mg/kg mb),阳性组腹腔注射地西泮(剂量为1 mg/kg mb),对照组灌胃灭菌水(剂量为5 mg/kg mb),所有实验小鼠每日称质量,连续给药7 d后进行戊巴比妥钠诱导睡眠行为学实验,评估睡眠质量,再继续给药4 d后进行解剖取样;通过酶联免疫吸附试验测定小鼠血清和脑组织中5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)、5-羟基吲哚乙酸(5-hydroxyindoleacetic acid,5-HIAA)、谷氨酸(glutamate,Glu)、β-内啡肽(β-endorphin,β-EP)、皮质醇、去甲肾上腺素(noradrenaline,NE)的质量浓度以及对GABA/Glu值进行评估;实时荧光定量聚合酶链式反应分析TPTLN对下丘脑中γ-氨基丁酸A型受体α1亚单位(γ-aminobutyric acid A receptor α1,GABAA-α1)和5-羟色胺受体1A(5-hydroxytryptamine receptor 1A,5-HT1A)mRNA相对表达水平的影响。结果:相比于对照组,TPTLN在戊巴比妥钠的协同下可以提高小鼠的入睡率至100%,睡眠潜伏期显著缩短31.7%(P<0.05),睡眠时长延长1.1 倍(P<0.05);血清和脑组织中GABA/Glu的比值分别提高了68.8%和19.3%,明显改善了GABA/Glu抑制/兴奋代谢失衡(P<0.001,P<0.000 1),血清中GABA的质量浓度高度显著提高了49.4%(P<0.001),脑组织中5-HT的水平上升了7.6%,脑组织中皮质醇、NE的含量分别显著降低了24.3%和23.4%(P<0.05);显著上调了GABAA-α1和5-HT1A基因表达水平(P<0.01、P<0.05),分别是对照组的1.5 倍和1.3 倍。结论:酪蛋白源肽TPTLN具有良好的助睡眠作用,其机制可能与调控GABAA-α1、5-HT1A的水平及脑内神经递质GABA、Glu、5-HT、皮质醇、NE的含量有关。
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