探究罗汉果干果多糖(Siraitia grosuenorii polysaccharide,SGP)的结构及其免疫调节活性。利用水提醇沉的方法从罗汉果干果中提取粗多糖,进一步经Cellulose DE-52和Sephadex G-200柱分离纯化获得均一多糖组分SGP-C2和SGP-D1。采用PMP柱前衍生及配备有示差折光检测器的高效液相色谱系统测定其单糖组成和分子质量,并通过红外光谱与核磁共振对其结构进一步表征。采用中性红比色法检测SGP-C2和SGP-D1对RAW264.7细胞的吞噬活性,荧光探针DCFH-DA试剂检测其活性氧(reactive oxygen species,ROS)的释放,Griess法检测其NO生成以及利用酶联免疫吸附检测试剂盒检测其对肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF)-α与白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)分泌水平的影响。SGP-C2和SGP-D1是由葡萄糖醛酸、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖(galactose,Gal)、阿拉伯糖组成的杂多糖,其单糖物质的量之比分别为0.78∶1.84∶26.57∶1.31∶0.49∶0.06和1.37∶2.00∶20.79∶0.61∶0.12∶0.25,分子质量分别为5.0×105 Da和7.6×105 Da。核磁共振谱图显示SGP-C2主链结构为→4)-α-D-GalpA-(1→和→4)-α-D-GalpAMe-(1→,而SGP-D1主链结构为→4)-α-D-GalpA-(1→。同时,6.25~25 µg/mL质量浓度范围的SGP-C2和SGP-D1具有促进巨噬细胞吞噬、NO生成、TNF-α和IL-6分泌的作用,SGP-D1还具有促进ROS释放的活性。结果表明,罗汉果多糖SGP-C2和SGP-D1具有体外免疫调控活性,为罗汉果多糖资源的开发利用提供了科学依据和技术路线。
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