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—— 中国食品杂志社
本研究通过外源添加蛋白激酶A和S-亚硝基谷胱甘肽，分析磷酸化和亚硝基化影响磷酸丙糖异构酶活性随时间变化的规律。通过构建不同温度条件下磷酸丙糖异构酶磷酸化和亚硝基化修饰高表达模型，探究磷酸化和亚硝基化在调节磷酸丙糖异构酶活性中的作用。结果表明，4 ℃体外条件下，对照组样品在孵育6 h的磷酸丙糖异构酶活性、磷酸化水平和亚硝基化水平显著低于恒温＋修饰组，磷酸化和亚硝基化共同作用提高了磷酸丙糖异构酶活性。与恒温＋修饰组相比，幅度波动＋修饰组磷酸化对酶活性的作用减弱，频率波动＋修饰组亚硝基化对酶活性的作用增强。幅度波动＋修饰组和频率波动＋修饰组样品孵育6 h的β-折叠相对含量显著高于恒温＋修饰组，无规卷曲相对含量显著低于恒温＋修饰组。温度波动延缓磷酸丙糖异构酶结构的解聚。利用原子力显微镜观察发现，3 个处理组孵育12 h的磷酸丙糖异构酶形态小于0 h，温度波动不改变磷酸丙糖异构酶的最终解聚形态。综上，在4 ℃体外孵育条件下，磷酸化水平和亚硝基化水平的提高延缓了磷酸丙糖异构酶的活性下降，温度幅度或频率波动影响磷酸化和亚硝基化对酶活性的调节作用，使其在孵育早期的活性提高，抑制其结构从有序向无序转变。
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