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—— 中国食品杂志社
建立一种可对葡萄汁中大肠杆菌O157（Escherichia coli O157）直接检测的水凝胶数字聚合酶链式反应扩增技术（polymerase chain reaction，PCR）。该方法直接将样本与水凝胶PCR体系混合，通过热裂解释放细菌DNA，利用水凝胶材料的三维网络结构，实现靶标DNA的原位数字PCR扩增，扩增后形成的荧光信号以荧光点形式呈现，荧光点数量与DNA分子数量一一对应，从而实现精确定量分析。针对大肠杆菌O157设计PCR引物，建立方法体系，并进行可行性、灵敏性、特异性及真实样品实验。结果表明，该方法灵敏度高，检测限可低至单细菌水平，无需DNA提取纯化；特异性强，只检出目标细菌；无需样品前处理，并具有良好的抗抑制效果；从制样到结果报告的检测时间可降至40 min以内。所有葡萄汁污染样品均可直接检测，阳性检出率为100%，与稀释涂布平板方法检测结果一致，平均回收率为96.9%～112.0%，相对标准偏差为3.6%～12.4%。本检测方法具有快速、灵敏、无需样品前处理和操作简单等优点，适合于现场检测。
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