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土曲霉阿魏酸酯酶异源表达、酶学性质及在阿魏酸制备中的应用
来源:导入 阅读量: 32 发表时间: 2025-07-22
作者: 韩红祥,郭成城,魏胜华,陈阿娜,李松
关键词: 土曲霉;阿魏酸酯酶;异源表达;毕赤酵母;阿魏酸
摘要:

为提高阿魏酸酯酶(ferulic esterase,FAE)的发酵单位活力,将土曲霉FAE编码基因在毕赤酵母实现异源高效表达。重组毕赤酵母发酵活力为(17.38±0.34)U/mL,是原始菌株的35 倍左右。经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳检验得出,重组土曲霉阿魏酸酯酶(recombinant Aspergillus terreus ferulic esterase,rAtFAE)分子质量约为39 kDa。酶学性质研究表明rAtFAE最适pH值为6.0、最适反应温度为50 ℃,以咖啡酸甲酯、香豆酸甲酯、阿魏酸甲酯、芥子酸甲酯为底物时测得的kcat/Km值分别为255、237、112.64、96.85 L/(mol·min)。在以麸皮为原料制备阿魏酸的应用实验中,rAtFAE可以与木聚糖酶产生良好的协同作用并有效提升阿魏酸的释放量,最大释放量为(1 876.45±30.05)μg/g(以麸皮质量计)。

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