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溶藻弧菌褐藻胶裂解酶的高效表达及其在古罗糖醛酸寡糖制备中的应用
来源:导入 阅读量: 35 发表时间: 2025-08-25
作者: 王月,江君,江正强,闫巧娟,杨绍青
关键词: 褐藻胶裂解酶;高密度发酵;适冷性;盐激活性;古罗糖醛酸寡糖 
摘要:

本研究发掘得到1 种溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)来源的新型褐藻胶裂解酶基因VaAly7,并将其导入毕赤酵母中进行高效表达,其酶活力最高达到413 U/mL。通过QSFF强阴离子交换层析柱纯化后得到电泳级纯酶,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析表明其分子质量约为44 kDa。该酶的最适温度和最适pH值分别为30 ℃和7.0,为适冷性褐藻胶裂解酶。该酶显示出盐激活特性,在400 mmol/L NaCl条件下酶活力约可提高至对照组的8 倍。VaAly7是双功能酶,对聚古罗糖醛酸具有偏好性,可降解最短链底物为古罗糖醛酸五糖。利用VaAly7降解质量分数为10%的聚古罗糖醛酸,降解产物得率为86%,产物聚合度为1~5,平均分子质量为2.1 kDa。该酶在制备古罗糖醛酸寡糖方面具有应用潜力。

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