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—— 中国食品杂志社
本研究从黑曲霉（Aspergillus niger）中发掘出一种新型天冬氨酸蛋白酶（AnproA1）。多重序列比对分析表明，该蛋白酶属于胃蛋白酶样天冬氨酸蛋白酶A1家族，与产红青霉来源的天冬氨酸蛋白酶同源性最高（42.6%）。采用多种策略成功实现了AnproA1在法夫驹形氏酵母中高效分泌表达。在5 L发酵罐中进行高密度发酵后，发酵液中蛋白酶活力为15 250.0 U/mL，蛋白质量浓度为14.0 mg/mL。纯化后AnproA1的最适pH值和最适温度分别为2.5和55 ℃，且在pH 2.5～5.5及50 ℃以下具有良好的稳定性。该酶具有广泛的底物特异性，对κ-酪蛋白表现出最高水解活性，其次为血红蛋白。进一步利用AnproA1水解鸭血蛋白（血红蛋白和血浆蛋白）制备血管紧张素转化酶（angiotensin-converting enzyme，ACE）抑制活性肽。血红蛋白和血浆蛋白水解物表现出ACE抑制活性，其半抑制浓度分别为0.084 mg/mL和0.042 mg/mL。本研究可为天冬氨酸蛋白酶在法夫驹形氏酵母中高效表达和鸭血蛋白高价值生物转化提供理论参考。
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