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—— 中国食品杂志社
选择荧光假单胞菌aprX基因作为检测靶点，通过设计特异性聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）和规律间隔成簇短回文重复序列（clustered regularly interspaced short palindromic repeats，CRISPR）RNA（crRNA）引物，成功建立了一种基于CRISPR/CRISPR相关蛋白（CRISPR-associated protein，Cas）12a的荧光检测方法，用于乳制品中荧光假单胞菌的快速和高灵敏检测。结果显示，所建立的CRISPR/Cas12a荧光检测技术检测荧光假单胞菌的线性范围为102～108 CFU/mL，检测限为101 CFU/mL。该方法对沙门氏菌等常见致病菌均无交叉反应性，显示出优异的特异性。此外，所开发的检测方法在不同浓度的荧光假单胞菌加标样品（巴氏杀菌乳和超高温瞬时杀菌乳）中回收率为102.218%～111.981%。本研究建立的CRISPR/Cas12a荧光检测方法具有较高的检测灵敏度和菌株特异性，为荧光假单胞菌的快速检测方法的开发提供了新的思路。
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