
为应对鸭血制品中动物源性成分的掺杂问题,基于TaqMan探针多重实时荧光定量聚合酶链式反应(realtime fluorescence quantitative polymerase chain reaction,real-time PCR)技术开发一种可同步检测猪、鸡和鸭源性成分的高效检测方法。该方法针对上述物种线粒体16S rDNA基因的保守区域设计通用引物(UN-F/R),并在其可变区域设计特异性分子信标探针(Z-Probe、J-Probe、Y-Probe),通过优化反应条件及验证实验(特异性及灵敏度),建立多重real-time PCR检测体系。为评估市场掺假现状,采集本地19 份散装鸭血制品进行检测。结果表明,本方法能够在单管反应中同时检测并区分猪、鸡和鸭源性成分的荧光信号,展现出较高的特异性和灵敏度,其在鸭血制品中灵敏度达0.06 ng/μL,检出限为0.10%。实际样品检测显示,19 份鸭血样品中1 份检出猪源性成分,11份检出鸡源性成分,12 份检出鸭源性成分,与GB/T 38164—2019《常见畜禽动物源性成分检测方法 实时荧光PCR法》方法结果一致,但本方法灵敏度更高。因此,本研究建立的方法能有效、准确地鉴别鸭血制品中的猪、鸡源性掺杂成分,为多物种源性鉴别提供了准确、可靠的技术方法。
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