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—— 中国食品杂志社
为获得高亲和力的赭曲霉毒素A（ochratoxin A，OTA）纳米抗体，本研究利用pET22b-OTA重组表达系统，经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导及周质纯化制备纳米抗体，并对抗体的特性进行探究，通过分子对接分析纳米抗体与毒素结合的关键氨基酸位点。结果表明，成功制备了分子质量约14 kDa的OTA纳米抗体。该抗体半数抑制浓度达1.040 ng/mL，对黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素M1等霉菌毒素交叉反应率均小于30%，在25～95 ℃、pH 7.4、离子浓度25 mmol/L条件下及体积分数10%～80%甲醇溶液、丙酮溶液中保持稳定。分子对接结果证实，LYS45、GLU48等氨基酸残基通过氢键、π-π堆积及静电相互作用介导高亲和力结合。本研究成功制备了高亲和力的OTA纳米抗体，可为食品安全检测提供高性能分子工具，对保障食品安全具有现实应用价值。
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