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—— 中国食品杂志社
针对绵羊肉和山羊肉加工后表型特征丧失而难以区分导致的肉类食品掺假问题，基于重组酶辅助扩增（recombinase-aided amplification，RAA）技术，针对绵羊和山羊线粒体DNA的Cytb基因保守区域设计引物和探针，通过引物-探针组合筛选与反应温度优化，开发出一种同步检测绵羊和山羊源性成分的双重实时荧光RAA（real-time RAA）方法。结果表明，山羊引物Capra-F2/R2与绵羊引物Ovis-F2/R1组合扩增性能最佳。该方法在39 ℃恒温条件下反应30 min即可完成检测，无需复杂热循环步骤，对山羊肉和绵羊肉混合体系中绵羊和山羊源性成分检出限达0.5%（m/m），且与牛肉、猪肉、鸭肉等16 种常见肉类无交叉反应。在实际样品检测中，该方法能够准确鉴别绵羊和山羊源性成分，与实时荧光定量聚合酶链式反应检测结果完全一致，准确率为100%。综上，本研究建立的双重real-time RAA方法具有快速、灵敏、特异性强及设备依赖性低等优势，适用于绵羊和山羊源性成分的快速鉴别，可为肉类真实性鉴定提供技术支持。
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