领学术科研之先,创食品科技之新
—— 中国食品杂志社
期刊集群
重组大肠杆菌合成光学纯L-苯基乳酸
来源:食品科学网 阅读量: 114 发表时间: 2017-06-07
作者: 朱益波,鲁如彬,程 俊,王 颖,齐 斌,王立梅
关键词: L-2-羟基-3-苯基丙酸|巨大芽孢杆菌Z2013513|L-乳酸脱氢酶|葡萄糖脱氢酶|NADH再生|全细胞催化
摘要:

以巨大芽孢杆菌Z2013513基因组DNA为模板,分别PCR扩增得到L-乳酸脱氢酶基因(ldhL)和葡萄糖脱氢酶基因(gdh),将gdh与ldhL分别连接至表达载体pETDuet,获得共表达质粒pETDuet-ldhL-gdh。经转化和验证获得重组菌大肠杆菌BL21(DE3)/pETDuet-ldhL-gdh。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和比酶活力分析表明重组蛋白L-乳酸脱氢酶和葡萄糖脱氢酶均成功表达且具有酶活力。在37 ℃、200 r/min条件下,经60 min反应,催化底物苯丙酮酸合成24.26 mmol/L L-苯基乳酸。产物L-苯基乳酸光学纯度(>99%),底物摩尔转化率(59.55%),结果表明此重组体系可用于高效合成高光学纯L-苯基乳酸。

电话: 010-87293157 地址: 北京市丰台区洋桥70号

版权所有 @ 2023 中国食品杂志社 京公网安备11010602060050号 京ICP备14033398号-2