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玉米半胱氨酸蛋白酶的真核表达及酶学性质表征
来源:食品科学网 阅读量: 108 发表时间: 2017-06-07
作者: 刘回民,陈方奇,郑明珠,佟维娜,靳 松,刘景圣
关键词: 玉米半胱氨酸蛋白酶;真核表达;酶学性质
摘要:

玉米半胱氨酸蛋白酶是一种重要的蛋白水解酶,作为C1家族蛋白酶的一员,可在食品、医药等领域广泛应用。本研究从玉米幼苗中提取总RNA,反转录扩增得到玉米半胱氨酸蛋白酶基因,进而构建重组真核表达载体pPICZα-zmCP1,转化毕赤酵母GS115构建重组菌。对表达的玉米半胱氨酸蛋白酶进行酶学性质研究,结果表明该酶最适反应温度为55 ℃,最适反应pH值为6.0,具有较好的热稳定性和有机溶剂抗性,但是pH值的稳定性、金属离子耐受性表现一般。底物特异性研究发现,该酶对小分子底物具有较强的水解能力,且偏爱P1位点为精氨酸的底物。

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