目的:肠毒素sek基因在临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌株中较为流行,研究新型肠毒素sek基因的时序性表达可为食物中毒预防和疾病控制补充新的基础数据。方法:本研究针对实验室保存的食源性金黄色葡萄球菌菌株进行21 种肠毒素基因检测,筛选出3 株含sek基因的菌株SA005、SA008和SAB0,针对3 株菌株进行生长曲线测定,随后在培养不同时间段收集菌体提取RNA,利用实时荧光定量聚合酶链式反应(real time-polymerasechain reaction,real time-PCR)检测肠毒素sek基因在12~120 h的相对表达水平。结果:基因检测结果显示,菌株SA005含有16S、nuc、mecA、seb、sec、sek、sex基因,SA008含有16S、nuc、mecA、sea、sek、sex基因,SAB0含有16S、nuc、sek、sex基因。3 株菌株在胰酪胨大豆肉汤培养基中的生长曲线趋势较相似,18 h左右出现折点,之后细菌进入生长稳定期。3 株菌株的sek基因在12~120 h全程表达,SA005的sek基因在48 h时相对表达量最高,在84 h相对表达量最低;SA008在24 h时的相对表达量最高,在48 h相对表达量最低,在60~120 h表达量相对比较稳定;SAB0在12~120 h之间相对表达量呈现抛物线趋势,在60 h和72 h的表达量相对较高且差异不显著(P>0.05)。结论:3 株菌株sek表达水平存在明显差异,相同菌株sek基因不同时间点表达也存在差异性,菌株基因背景的影响可能是造成sek基因表达差异性的关键。
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