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白鲢鱼背侧肌焦磷酸酶的纯化及酶学特性
来源:食品科学网 阅读量: 121 发表时间: 2017-06-07
作者: 刘 玮,徐 萌,张雅玮,周 黎,马志方,王复龙,彭增起
关键词: 焦磷酸酶;纯化;酶学特性;背侧肌;白鲢鱼
摘要:

通过粗分离、50%~80%饱和度硫酸铵分级沉降、DE-52阴离子交换柱层析等步骤,从白鲢鱼背侧肌中分离纯化出焦磷酸酶。通过变性凝胶电泳分析,该酶在十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱中仅有一个分子质量为40 kD的条带。酶学特性研究表明,白鲢鱼背侧肌焦磷酸酶可专一性地水解焦磷酸盐,反应初速率时间范围为0~15 min,最适反应温度为45 ℃,最适反应pH值为7.5。Mg2+对该酶有明显的激活作用,在Mg2+浓度为5 mmol/L时酶活力最高。5 mmol/L的Ca2+、Zn2+、乙二胺四乙酸(ethylenediaminetetraacetic acid,EDTA)-Na2、EDTA-Na4、KIO3和1 mmol/L的NaF均对该酶有强烈的抑制作用。该酶水解焦磷酸四钠的最大反应速率为0.051 U/mg,米氏常数为0.54 mmol/L。

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