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韭菜β-木糖苷酶的分离纯化与部分性质研究
来源:食品科学网 阅读量: 112 发表时间: 2017-06-07
作者: 万 骥,王 丹,傅 婷,李蕊伽,廖海君,唐云明
关键词: 韭菜;β-木糖苷酶;分离纯化;酶学性质
摘要:

新鲜韭菜经匀浆、缓冲液提取、硫酸铵分级沉淀、羧甲基离子交换层析(carboxymethyl-sepharose,CMSepharose)再通过Superdex-200凝胶过滤层析,从而获得电泳纯的β-木糖苷酶。该酶的比活力达到18.25 U/mg,纯化倍数为12.59,回收率为1.83%,分子质量为123.02 kD,亚基分子质量为61.51 kD。通过对β-木糖苷酶的酶学性质研究得到最适温度为65 ℃,最适pH值为4。该酶在25~55 ℃及pH 3.0~5.0的范围内有较好的稳定性;在最适条件下测得其米氏常数(Km)值为0.28 mmol/L;甲醇、乙醇、异丙醇及十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate,SDS)和Ag+对该酶具有抑制作用,Mn2+和Co2+对该酶具有一定的激活作用。

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