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3 种食源性致病菌Tem-PCR检测方法的建立
来源:食品科学网 阅读量: 113 发表时间: 2017-06-07
作者: 刘忠梅,徐义刚,曲 敏,莫春生,刘新亮,李苏龙
关键词: 靶序列富集多重PCR方法;沙门氏菌;金黄色葡萄球菌;志贺氏菌
摘要:

应用靶序列富集多重聚合酶链式反应(target-enriched multiplex-polymerase chain reaction,Tem-PCR)技术建立金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和志贺氏菌3 种食源性致病菌的快速检测方法。分别以金黄色葡萄球菌femA基因、沙门氏菌invA基因和志贺氏菌ipaH基因为靶基因,设计3 对特异性引物,并与通用引物连接组成Tem-PCR引物,通过反应条件优化,建立了Tem-PCR检测方法。结果显示,建立的Tem-PCR方法特异性强,对沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和志贺氏菌的检测灵敏度分别为1.1×103、2×103 CFU/mL和1.2×103 CFU/mL。Tem-PCR检测方法有效地解决了传统多重PCR引物扩增效率不均衡的问题。

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