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—— 中国食品杂志社
为提高常规稀释复性方法的复性效率，以重组绿色荧光蛋白(green fluorescent protein，GFP)包涵体为模型，开发一种新的双变性- 稀释复性方法。新方法选取含有精氨酸的碱性复合溶液作为第一变性剂溶解GFP 包涵体，通过梯度降低变性液的酸碱度析出溶解目的蛋白，再以尿素为第二变性剂溶解析出的蛋白，随后进行稀释复性。结果显示：与常规方法比，新方法复性的绿色荧光蛋白活性收率提高至1.5～2.3 倍，复性蛋白对温度、溶液酸碱度及变性剂的稳定性提高。增强型绿色荧光蛋白(enhanced GFP，EGFP)及其融合蛋白的包涵体采用新方法进行复性，均取得80% 以上的活性回收率，说明新方法对GFP 系列融合蛋白的包涵体具有一定的适用性。新方法从变性剂使用与包涵体结构的关系出发，突破常规操作中变性剂单次使用的局限，既保留了简便性又提高了常规稀释复性方法的效率。
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