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—— 中国食品杂志社
从玉米嫩叶中提取总RNA，通过RT-PCR的方法扩增出玉米谷氨酰胺转胺酶(TGase)全长基因，回收目的片段并测序，该基因编码区全长1605bp，编码535个氨基酸残基，分子量为60.9kD，与GenBank(登录号：AJ421525)上已发表的序列同源性为100%。按正确的阅读框架将玉米TGase基因片段定向克隆到表达载体pET-28a上，将重组质粒转化到大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株，1mmol/L IPTG诱导融合蛋白表达，经凝胶分析软件测得蛋白表达量约占总蛋白的15%，以His-Tag抗体作为一抗，采用Western-blot方法检测目的蛋白，结果证明所表达的特异蛋白是带有His-Tag的重组融合蛋白，利用Ni2+-NTA琼脂糖树脂亲和层析柱纯化目的蛋白，SDS-PAGE鉴定为单一条带，测得纯化后的TGase酶活力达到16U/mg。
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