从传统腊肉中筛选拮抗菌株,纯化鉴定新型抗菌物质并对其抗菌特性研究,为抗菌脂肽在食品防腐中的应用提供理论依据。采用抑菌圈法筛选拮抗菌株;通过酸沉淀、硅胶柱层析和半制备反相高效液相色谱分离纯化抗菌脂肽;通过傅里叶红外光谱、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱对脂肽鉴定。结果表明,筛选得到12 株拮抗细菌,其中菌株XLP27对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌以及对1 株酵母菌和4 株霉菌有明显抑菌作用。拮抗菌株XLP27鉴定为短小芽孢杆菌,其抗菌物质主要在稳定期合成,并在发酵60 h时达到最大产量。分离纯化得到单一组分抗菌物质,并鉴定为环状脂肽Iturin A,其由m/z 1 046.182、1 060.213、1 074.198、1 088.201和1 102.175的5 个同系物组成,对应脂肪酸链长度C14~C18。脂肽具有极高的热稳定性,在40~100 ℃下保温30 min活性基本保持不变,在较宽的pH值范围(4~10)内稳定性好,且对所有蛋白水解酶不敏感。菌株XLP27所产抗菌物质主要是脂肽Iturin A,具有广谱抑菌活性,稳定性良好,有潜力在食品保鲜和农业生物防治领域替代传统抗菌剂使用。
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