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组成型过表达ido基因对4-羟基异亮氨酸合成的影响及其发酵培养基的响应面优化
来源:食品科学网 阅读量: 91 发表时间: 2019-09-26
作者: 何继龙,李英滋,韩世宝,满德恩,郭脉海,战俊杰,张成林
关键词: 4-羟基异亮氨酸|异亮氨酸羟化酶|谷氨酸棒杆菌|组成型过表达|响应面法
摘要:

为考察组成型过表达异亮氨酸羟化酶(isoleucine dioxygenase,IDO)基因ido对4-羟基异亮氨酸合成的影响,构建ido组成型表达质粒pXM01-ido及菌株HIL017,其ido转录量及IDO活性较诱导型过表达菌株HIL016显著提升,4-羟基异亮氨酸产量较HIL016提高19.4%。为进一步提高4-羟基异亮氨酸产量,通过Plackett-Burman试验确定HIL017发酵培养基中玉米浆、谷氨酸和FeSO4·7H2O用量为主要影响因素,利用最陡爬坡试验和响应面法确定其最优用量为玉米浆34.1 mL/L、谷氨酸2.98 g/L、FeSO4·7H2O 0.016 7 g/L,此时4-羟基异亮氨酸理论产量为5.57 g/L。验证实验结果表明,最佳条件下4-羟基异亮氨酸产量为5.53 g/L,较优化前提高19.7%。

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