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4 种植物源性成分多重real-time PCR检测方法的建立及其在食用淀粉中的应用
来源:导入 阅读量: 116 发表时间: 2024-02-20
作者: 范维,高晓月,董雨馨,刘虹宇,李贺楠,赵文涛,郭文萍
关键词: 多重实时聚合酶链式反应;食用淀粉;木薯;红薯;马铃薯;玉米
摘要:

建立一种可同时快速检测红薯、木薯、马铃薯、玉米源性成分的多重实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)方法。分别以红薯g3pdh基因、木薯g3pdh基因、马铃薯UGPase基因、玉米zSSIIb基因为靶基因设计特异性引物和TaqMan探针,以18S rRNA基因为内参基因,建立多重real-time PCR方法,开展方法学验证,并对不同掺入比例模拟样品和实际淀粉样品进行检测。结果显示,该方法具有高通量、特异性强、灵敏度高等优点。与15 种非目标源性均无交叉反应;对目标DNA的检测灵敏度可达到3×10-3 ng/μL,且具有良好的线性关系和扩增效率;对淀粉样品的检出限可达0.1%,对50 份实际样品进行检测,结果与参比方法一致,说明建立的多重real-time PCR法可用于食用淀粉种类掺假鉴别检测。

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