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—— 中国食品杂志社
本实验在大肠杆菌BL21star（DE3）中构建2’-岩藻糖基乳糖（2’-fucosyllactose，2’-FL）的从头合成途径，通过CRISPR/Cas9系统敲除β-半乳糖苷酶基因lacZ和UDP-葡萄糖脂质载体转移酶基因wcaJ，探究不同来源α-1,2-岩藻糖基转移酶对2’-FL合成的影响，调控合成途径基因的转录水平，并进行工程菌发酵条件优化。结果表明，初始工程菌摇瓶发酵72 h后2’-FL产量为0.34 g/L，敲除lacZ和wcaJ基因后发酵72 h合成的2’-FL质量浓度提高到2.12 g/L。脆弱拟杆菌（Bacteroides fragilis）来源α-1,2-岩藻糖基转移酶WcfB产量提升效果最好，摇瓶发酵合成的2’-FL质量浓度达4.12 g/L。经发酵条件优化，工程菌BLW-2在28 ℃和异丙基-β-D-硫代半乳糖苷终浓度0.2 mmol/L条件下，摇瓶发酵合成的2’-FL质量浓度提高至5.01 g/L，5 L发酵罐中分批补料发酵合成的2’-FL质量浓度达31.2 g/L。
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