分别基于SYBR Green实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)和TaqMan real-time PCR技术检测特种乳及其热处理加工产品中掺假的牛乳成分,同时探讨不同热处理方式对掺假检测的影响,以满足不同商品化特种乳制品的检测要求。结果表明,所设计的牛特异性引物可以扩增牛乳中的DNA,与非目标动物无交叉反应性,具有较高的特异性。两种real-time PCR方法对于牛乳DNA的检测限分别为1 pg(SYBR Green)和10 pg(TaqMan),且均可以最低检测出特种乳混合物中0.1%(m/m)牛乳成分掺伪。为评估掺假模拟的重现性,在3 d内共进行了9 次重复实验,验证了方法具有较高的重复性。同时,为检测本研究中所建立实验方法的可用性,对20 种商业加工特种乳制品进行了真实性分析,其中在7 种产品中检测出牛乳成分,显示出所建立的检测方法具有较高的分辨率和实际应用价值。
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