为开发用于治疗2型糖尿病的天然植物降血糖成分,本实验以药食同源植物青钱柳叶中的黄酮类化合物为研究对象,通过乙醇回流提取与聚酰胺柱纯化,得到棕黄色黄酮类化合物提取物。利用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱鉴定出其中包含的17 种黄酮类化合物,从中选择3 种化合物标准品与青钱柳叶黄酮提取物(flavonoid extract of Cyclocarya paliurus leaves,FEC)分析其改善胰岛素抵抗活性。借助HepG2细胞建立胰岛素抵抗模型,通过优化得出最佳建模条件为葡萄糖质量浓度4.5 g/L、胰岛素浓度0.001 μmol/L、地塞米松浓度3.5 μmol/L,联合诱导HepG2细胞24 h,建立的胰岛素抵抗模型能稳定存在48 h,并且能够被临床降血糖药物二甲双胍治疗。基于胰岛素抵抗模型对黄酮类化合物进行研究发现,FEC、金丝桃苷、野黄芩苷在质量浓度为10-2 mg/mL时改善胰岛素抵抗活性最高,而山柰酚质量浓度为10-4 mg/mL时活性最高。进一步的研究表明,青钱柳叶黄酮类化合物可能是通过改善胰岛素抵抗模型的糖原代谢紊乱和提高氧化应激能力,从而起到改善胰岛素抵抗作用。
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