本实验研究二元基质(氨基-4-羟基苯甲酸(amino-4-hydroxybenzoic acid,AHB)/2,5-二羟基苯甲酸(2,5-dihydroxybenzoic acid,DHB)、3-羟基香豆素(3-hydroxycoumarin,3-HC)/DHB)、离子液体基质(N,N-二甲基苯胺/DHB、2-(对羟基苯偶氮)苯甲酸/1,1,3,3-四甲基胍(1,1,3,3-tetramethylguanidine,TMG)、4-羟基香豆酸/TMG、2,4,6-三羟基苯乙酮(2,4,6-trihydroxyacetophenone,THAP)/TMG、N-甲基苯胺(N-methylaniline,NMA)/DHB)和反应性基质(3-肼基苯甲酸(3-hydrazylbenzoic acid,3-HBA)/DHB、6-肼烟酸(6-hydrazine niacin,HYNIC)/DHB、2-肼吡啶(2-hydrazopyridine,2-HPM))对基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)检测麦芽八糖、半乳糖醛酸三糖和Dextran T6效果的影响,并与3 种固体基质对比(DHB、THAP、α-氰基-4-羟基肉桂酸)。以麦芽八糖为例,研究各基质溶剂对检测寡糖效果的影响,针对反应性基质还研究了溶剂、反应时间、反应温度对衍生化率的影响。结果表明,对于麦芽八糖,3 类基质均具有较理想的检测效果,谱图重现性好、质谱峰强度增加。对于反应性基质,其衍生化的反应温度至少为65 ℃,其中2-HPM在各条件下均具有高衍生效率((96.28±0.28)%),且能在较短时间(15 min)内完成衍生化反应,但是衍生化寡糖的信噪比(RSN)不高,而3-HBA/DHB和HYNIC/DHB衍生化寡糖的RSN高,但是衍生化效率较低,且反应时间至少需要60 min。此外,寡糖浓度对衍生化效率影响显著,当浓度低于108 fmol/L,衍生化寡糖信号很低或未被检测到。当THAP及3-HBA/DHB为基质时,其半乳糖醛酸三糖的质谱信号显著高于其余基质类型;对于Dextran T6,二元基质和离子液体基质的检测效果较优,其中AHB/DHB、3-HC/DHB、THAP/TMG、NMA/DHB为基质具有更广的分子质量测定范围,最高均可检测聚合度为36的多糖质谱峰。本实验系统研究不同类型基质对MALDI-TOF-MS检测3 种不同类型碳水化合物效果的影响,研究结果可为碳水化合物的分析鉴定提供参考依据。
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