
目的:研究鲟鱼肝金属硫蛋白对秀丽隐杆线虫的紫外线(ultraviolet rays,UV)损伤修复作用。方法:以杂交鲟肝脏为原料,经Tris-HCl缓冲液(0.04 mol/L、pH 8.0)50 ℃水浴提取、80 ℃热处理及冷冻干燥制备金属硫蛋白。通过测定线虫寿命、摆头频率、身体弯曲频率、抗氧化酶活力等指标的变化,探究金属硫蛋白的UV损伤修复作用。通过实时聚合酶链式反应技术分析金属硫蛋白在转录水平上对线虫造成的影响,推测其发挥UV损伤修复作用的可能机制。结果:0.3、0.4、0.5 mg/mL的金属硫蛋白均能够抵抗UV损伤造成的寿命缩短、运动能力降低的影响,有效升高UV损伤线虫体内超氧化物歧化酶、过氧化氢酶的水平,降低丙二醛含量,并降低线虫体内活性氧及脂褐素的水平,下调线虫体内daf-2、age-1、pdk-1、akt-1的表达,上调daf-16和skn-1的表达。结论:鲟鱼肝金属硫蛋白能有效修复UV辐射对线虫造成的损伤,其机制可能是通过激活胰岛素/胰岛素样生长因子信号通路,上调超氧化物歧化酶和过氧化氢酶的表达水平,进而清除活性氧,修复UV损伤。
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