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菠萝泛菌β-1,4-内切葡聚糖酶基因克隆、表达与酶活性分析
来源:食品科学网 阅读量: 121 发表时间: 2017-06-07
作者: 侯进慧,张 翔,乔高翔
关键词: 内切葡聚糖酶;原核表达;活性分析
摘要:

利用分子克隆的方法,对一种源于菠萝泛菌的内切葡聚糖酶(即β-1,4-内切葡聚糖酶)基因进行克隆、原核表达,利用Ni-NTA吸附柱对表达的重组内切葡聚糖酶进行纯化,分析重组酶的活性。研究结果显示,此重组内切葡聚糖酶含1 个1 002 bp的开放阅读框,编码334 个氨基酸序列,重组酶在大肠杆菌细胞中的表达量占可溶性蛋白的50%以上,经过纯化获得了纯度高于95%的内切葡聚糖酶蛋白,酶活力可以达到2 245 U/mL。

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