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荧光假单胞菌、沙门氏菌和单增李斯特菌多重PCR检测方法的建立
来源:食品科学网 阅读量: 116 发表时间: 2017-06-07
作者: 胡冰雪,舒沿沿,潘道东,曾小群,吴 振
关键词: 多重聚合酶链式反应;检测方法;荧光假单胞菌;沙门氏菌;单增李斯特菌
摘要:

针对肉制品中易污染的荧光假单胞菌、沙门氏菌和单增李斯特菌等有害微生物,通过3 种标准菌株及肉制品建立多重聚合酶链式反应方法,实现肉制品中这3 种菌的同时、快速检测。利用荧光假单胞菌的gyrB基因、沙门氏菌的invA基因和单增李斯特菌的hlyA基因设计3 对特异性引物,在确定引物特异性的基础上,对3 种标准菌株及在冷却肉上过夜富集后进行灵敏度检测。结果表明,该多重聚合酶链式反应方法对于同时检测这3 种有害微生物具有高度的特异性;同时检测这3 种菌时,纯菌DNA检测限可达1 pg/μL;将3 种菌一起接种到冷却肉中35 ℃过夜培养后,荧光假单胞菌、沙门氏菌和单增李斯特菌的检测限分别可达到9、5、70 CFU/mL。

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