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—— 中国食品杂志社
采用聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）法从蜡状芽孢杆菌（Bacillus cereus）中扩增了β-环糊精葡萄糖基转移酶（β-cyclodextrin glucanotransferase，β-CGTase）基因，将该基因克隆到pBV220质粒中，转化E.coli DH5α，经氨苄青霉素抗性筛选和酶切验证后，得到能表达β-CGTase的重组大肠杆菌E.coliDH5α/pBVcgt。通过对工程菌产酶条件的优化，得到最佳产酶条件为：OD600 nm值达到1.0、初始培养温度30 ℃、发酵培养基初始pH 8.0、温度梯度诱导39 ℃培养0.5 h，40 ℃培养0.5 h，41 ℃培养1 h，42 ℃培养2 h。酶活力由优化前的445 U/mL提高到956 U/mL，酶活力提高了1.15 倍。温度梯度诱导比直接诱导酶活力提高20%。该酶的克隆表达以及发酵条件的研究表明，该酶能在大肠杆菌原核表达体系中高效表达。
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