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—— 中国食品杂志社
目的：利用筛选出的一株能产D-阿拉伯糖异构酶(D-AI)的耐热菌株，将D-半乳糖转化为D-塔格糖。方法：从实验室保藏的菌株中筛选出一个产D-阿拉伯糖异构酶能力较强的苍白芽孢杆菌，将该菌株中的D-阿拉伯糖异构酶基因D-AI克隆到载体pET-28a上，并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中表达。通过SDS-PAGE分析发现，重组菌株能表达出大量可溶性蛋白。结果：D-阿拉伯糖异构酶纯化酶的最适反应pH值和温度分别是7.0和60℃，在pH6.0～8.0范围和30～70℃范围内具有较好的稳定性。加入Mn2+、Zn2+、Fe2+、Ca2+和Ba2+均能够使D-塔格糖的转化率提高，而Mg2+和Cu2+则对酶活力产生不同程度的抑制。结果表明：底物质量浓度为18g/L的D-半乳糖(含5mmol/L Mn2+)，加入到pH值为7.0的重组细胞粗酶液中，在60℃条件下反应12h，可达到最高转化率为41.6%。结论：这表明具有生物活性的重组D-AI在大肠杆菌E.coli(BL21)中成功表达且具备工业化生产D-塔格糖的潜能。
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