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速冻食品中沙门氏菌和金黄色葡萄球菌多重PCR检测方法的建立与应用
来源:食品科学网 阅读量: 110 发表时间: 2017-06-07
作者: 滕要辉,索 标,艾志录,谢新华,潘治利
关键词: 速冻食品;多重聚合酶链式反应;检测;沙门氏菌;金黄色葡萄球菌
摘要:

为实现速冻食品中沙门氏菌(Salmonella spp.)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的多重聚合酶链式反应(PCR)检测,首先优化多重PCR扩增的反应条件,比较基因组DNA提取方法,结果表明:退火温度采用60℃、各引物浓度200nmol/L及扩增循环35次,本多重PCR检测技术可以有效地将沙门氏菌和金黄色葡萄球菌同时检出,检测特异性为100%。3种DNA提取方法中试剂盒法纯度最高,检出限分别是31、26DNA copies/reaction。经过在人工污染致病菌的速冻水饺中应用试验后,该多重PCR方法经过4h的增菌培养即可从速冻水饺中同时检测出起始菌落数低至100CFU/g的沙门氏菌和金黄色葡萄球菌。

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