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植物乳杆菌KLDS1.0391所产细菌素的纯化
来源:食品科学网 阅读量: 93 发表时间: 2017-06-07
作者: 王辉,孟祥晨
关键词: 分子量
摘要:

目的是为了分离纯化植物乳杆菌KLDS1.0391代谢产生的细菌素。采用蛋白质层析技术分离细菌素,采用质谱测定纯化后细菌素的分子量。经过实验比对,最终确定的分离纯化路线为:植物乳杆菌KLDS1.0391的无细胞上清液首先经过饱和度为70%的硫酸铵沉淀,收集的沉淀溶于1/40体积0.02 mol/L的乙酸钠缓冲液(pH 6.5),复溶后的样品采用SP Sepharose fast flow阳离子填料和COLUMN XK 16/20层析柱进行阳离子纯化,之后采用SOURCE 15RPC ST 4.6/150进行反相纯化。对收集到的具有抑菌活性的样品经高效液相色谱检测,判断其纯度达到质谱分析要求,经Tricine-SDS-PAGE检测,初步判定其分子量约为2000 kDa。采用质谱MALDI-TOF测定该细菌素的分子量为1770 kDa。

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