目的:研究经酶解-微波辅助萃取、超滤分级纯化的灰树花子实体多糖的免疫活性。方法:采用复合酶解结合微波辅助萃取方法提取灰树花子实体多糖,采用超滤工艺对提取多糖进行分级纯化;采用MTT法研究多糖对小鼠脾淋巴细胞、ConA/LPS诱导的小鼠脾淋巴细胞的增殖作用;建立荷瘤小鼠模型,研究灰树花多糖对肿瘤的抑制作用。结果:获得分子质量范围为<50kD的GFP-I、50~100kD的GFP-II和100~200kD的GFP-III;与RPMI-1640对照组相比,GFP-I、GFP-II和GFP-III对淋巴细胞增殖率分别增加26.558%~74.167%(P<0.001)、20.175%~152.075%(P<0.001)和26.473%~334.797%(P<0.001);对ConA诱导的淋巴细胞增殖率分别增加31.408%~122.894%(P<0.001)、53.075%~235.693%(P<0.001)和83.347%~367.241%(P<0.001);对LPS诱导的淋巴细胞增殖率分别增加20.526%~97.075%(P<0.001)、38.288%~211.348%(P<0.001)和54.454%~344.883%(P<0.001);相对于生理盐水(NS)组,在实验剂量范围内,GFP-I、GFP-II和GFP-III对S180肿瘤的抑制率分别达到10.15%~22.94%(P<0.001)、12.79%~30.10%(P<0.001),23.86%~51.65%(P<0.001)。结论:经复合酶-微波辅助萃取、超滤分级纯化后多糖具有显著免疫活性和抗肿瘤活性,其中GFP-III具有比GFP-I和GFP-II更强的免疫活性和抗肿瘤活性,而且活性与其浓度正相关,多糖可能以对T淋巴细胞增殖的促进作用为主。
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