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—— 中国食品杂志社
本研究确定了分离纯化乳酸乳球菌细胞壁蛋白酶(CEP)的最佳技术路线。用裂解液(50mmol/LTris-HCl,2mmol/LEDTA-Na2,100mmol/LNaCl,0.5%Tritonx-100,1mg/ml溶菌酶,pH8.5)悬浮菌体(20ml/g),37℃下保温3h,离心后取上清液即为粗酶液。粗酶液通过45%硫酸铵沉淀,DEAE-SephadexA-25和Sephacryl-S-300HR两步层析,可以得到纯化的细胞壁蛋白酶。蛋白酶提纯倍数达到74.048%,最后回收率为14.865%,PAGE电泳检测为一条带,SDS-PAGE检测蛋白酶为单体结构,分子量大约为53kD。用纯化后CEP酶解乳清蛋白,酶解液ACE抑制率为45%。
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