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沙门氏菌DNA提取及PCR反应条件的优化
来源:食品科学网 阅读量: 109 发表时间: 2017-06-07
作者: 邵碧英, 陈彬, 汤敏英, 吴谦, 张体银
关键词: 沙门氏菌; 基因组DNA; PCR; 优化;
摘要:

分别采用煮沸法和CTAB/NaCl法提取沙门氏菌及对照菌株的基因组DNA,紫外测定和电泳结果表明CTAB/NaCl法提取到的DNA的浓度和纯度较煮沸法理想。合成分别扩增沙门氏菌属特异基因hut基因(495bp)、hilA基因(490bp)、invA基因(284bp)和hns基因(152bp)的引物,对PCR反应条件进行了优化。结果表明可同时用于这四种基因检测的PCR反应条件为:94℃预变性5min;94℃变性40s,60℃退火40s,72℃延伸50s,40个循环;72℃延伸5min。

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