领学术科研之先，创食品科技之新
—— 中国食品杂志社
研究单宁酶AfTanA中Kex2蛋白酶切割位点（K315-R316）对酶学性质的影响。通过对单宁酶AfTanA中Kex2蛋白酶切割位点（K315-R316）进行定点突变，构建单点突变体AfTanR316A和缺失突变体AfTanΔKR。经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰氨凝胶电泳检测发现两突变体Kex2蛋白酶抗性明显增强。经对酶学性质对比发现，两突变体具有较低的催化反应温度和较强的稳定性。单宁酶的最适反应温度由40 ℃（野生型）降低到20 ℃（两突变体）。突变体AfTanΔKR和突变体AfTanR316A在pH 12.0条件下处理1 h后，剩余酶活力由野生型AfTanA的0%提高到85%和60%；而在50 ℃条件下处理1 h后，剩余酶活力由野生型AfTanA的2%提高到40%和21%，上述性质的改变有利于单宁酶在低温条件的应用和酶制剂的生产贮存。突变体AfTanR316A动力学参数Km和Vmax分别为1.149 mmol/L和10.427 mmol/（L·min），AfTanΔKR的动力学参数Km和Vmax分别为1.46 mmol/L和35.84 mmol/（L·min）。此外，柿子汁经野生型单宁酶AfTanA和突变体处理后，多酚含量均提高50%左右。综上所述，单宁酶AfTanA中的Kex2蛋白酶切割位点（K315-R316）对酶的稳定性和催化效率影响显著，改造后的单宁酶AfTanΔKR能够更好地应用在食品工业中。
2023年第44卷 2022年第43卷 2021年第42卷 2020年第41卷 2019年第40卷 2018年第39卷 2017年第38卷 2016年第37卷 2015年第36卷 2014年第35卷 2013年第34卷 2012年第33卷 2011年第32卷 2010年第31卷 2009年第30卷 2008年第29卷 2007年第28卷 2006年第27卷 2005年第26卷 2004年第25卷 2003年第24卷 2002年第23卷 2001年第22卷 2000年第21卷 1999年第20卷 1998年第19卷 1997年第18卷 1996年第17卷 1995年第16卷 1994年第15卷 1993年第14卷 1992年第13卷 1991年第12卷 1990年第11卷 1989年第10卷 1988年第09卷 1987年第08卷 1986年第07卷 1985年第06卷 1984年第05卷 1983年第04卷 1982年第03卷 1981年第02卷 1980年第01卷
电话: 010-87293157
地址: 北京市丰台区洋桥70号
版权所有 @ 2023 中国食品杂志社 京公网安备11010602060050号 京ICP备14033398号-2
