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—— 中国食品杂志社
为实现对致病菌铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）的快速微量检测，本研究首先利用全细胞指数富集的配体系统进化技术，筛选靶向铜绿假单胞菌的特异性单链DNA（single-stranded DNA，ssDNA）适配体。经15 轮富集后共获得30 个ssDNA序列，比较吉布斯自由能ΔG和解离常数Kd后，确定适配体Apt13的特异性和亲和力最佳，可用于铜绿假单胞菌的检测。异硫氰酸荧光素（fluorescein isothiocyanate，FITC）标记菌体形成的FITC-P. aeruginosa复合物具有荧光，适配体Apt13的加入可猝灭其荧光，而反筛菌大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和溶壁微球菌不影响Apt13对FITC-P. aeruginosa荧光的猝灭作用。基于此现象构建了用于铜绿假单胞菌检测的荧光系统。通过适配体Apt13对待测样本中荧光的猝灭情况判断是否存在铜绿假单胞菌。在确定Apt13最佳使用浓度及其与P. aeruginosa孵育的最优时间基础上，Apt13猝灭的荧光强度与铜绿假单胞菌在101～108 CFU/mL范围内呈线性关系，检出限为2 CFU/mL，检测可在2.0 h内完成，并可对水样中铜绿假单胞菌实现有效检测。
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