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—— 中国食品杂志社
为快速筛选获得具有抗炎活性的益生菌，构建一种双荧光素酶报告基因系统筛选方法。将含有核因子-κB（nuclear factor-kappa B，NF-κB）响应元件的双荧光素酶质粒转染至293T细胞，通过优化转染条件以及脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）诱导浓度等条件，建立筛选系统。采用该系统对筛选得到的86 株菌株抗炎活性进行评价，同时采用巨噬细胞RAW264.7炎症模型进行对比。结果表明，最佳转染条件为：pNF-κB-luc质粒与pRL-TK质粒比50∶1、质粒与转染试剂比1∶1、转染时间24 h、LPS诱导质量浓度100 ng/mL。对比结果显示，本实验建立的双荧光素酶报告系统具有可靠性（Z’＝0.663 2）与稳定性（R2＝0.746 99），菌株筛选结果与RAW264.7炎症模型筛选结果一致。通过本方法最终获得植物乳植杆菌X30、发酵粘液乳杆菌X58与融合魏斯氏菌X83共3 株具有良好抗炎活性的菌株，可有效抑制NF-κB通路的激活，显著降低白细胞介素（interleukin，IL）-1β、肿瘤坏死因子-α、NF-κB p65炎症因子的表达，提高IL-10的表达。本系统为靶向筛选具有抗炎活性的益生菌提供了新思路。
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