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—— 中国食品杂志社
目的：研究甜叶菊提取物异绿原酸（isochlorogenic acid，ICGA）对氧化应激损伤肠道的缓解效果。方法：采用福林酚比色法检测甜叶菊提取物中总多酚的含量；高效液相色谱法分析甜叶菊提取物中ICGA含量；细胞毒性实验（cell counting kit-8，CCK-8）和试剂盒检测丙二醛（malondialdehyde，MDA）、总抗氧化能力（total antioxidant capacity，T-AOC）、过氧化氢酶（catalase，CAT）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）活性，筛选H2O2作用浓度和时间，并以此构建肠上皮细胞氧化应激损伤模型；通过CCK-8筛选甜叶菊提取物ICGA的安全范围和缓解猪小肠上皮细胞（intestinal porcine epithelial cell J2，IPEC-J2）细胞氧化应激损伤的适宜浓度；以抗氧化指标（MDA、T-AOC、CAT、SOD和GSH-Px）、紧密连接蛋白基因（Claudin-1、ZO-1、Occludin）、抗凋亡基因Bcl-2和促凋亡基因Caspase-3的mRNA相对表达量，明确甜叶菊提取物ICGA对肠道上皮细胞氧化应激损伤的保护作用。结果：甜叶菊提取物中总多酚的质量分数达67.68%，且3 种ICGA同分异构体总质量分数达64.23%；经200 μmol/L H2O2处理1 h建立肠道细胞氧化应激损伤模型，此时细胞存活率和抗氧化活性显著下降（P＜0.05）；与模型组相比，甜叶菊提取物ICGA预处理组（50 μmol/L和100 μmol/L）中细胞存活率分别从77.49%增加到90.23%和95.99%，且CAT、SOD活力和T-AOC显著增加，而MDA含量显著下降（P＜0.05）。甜叶菊提取物ICGA预处理均显著提升了细胞中Claudin-1和Occludin的mRNA相对表达量（P＜0.05），细胞中Caspase-3的mRNA相对表达量显著降低（P＜0.05）；且100 μmol/L的甜叶菊提取物ICGA组效果更好。综上，甜叶菊提取物ICGA可能通过提高抗氧化酶的活性、降低脂质过氧化物累积、改善肠道通透性以提高肠道屏障功能缓解肠道氧化应激。
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