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转基因玉米CC-2双重微滴式数字聚合酶链式反应检测方法的建立与应用
来源:导入 阅读量: 0 发表时间: 2025-12-26
作者: 何禹璇,闫伟,赵宁,邢珍娟,董立明,马月,杨帆,龙丽坤,李飞武
关键词: 转基因玉米CC-2;微滴式数字聚合酶链式反应;定量检测
摘要:

本研究聚焦我国自主研发的转基因玉米CC-2,建立一种基于微滴式数字聚合酶链式反应(droplet digital polymerase chain reaction,ddPCR)高特异性、高灵敏度的定量检测方法。针对CC-2转化体中特异性插入序列设计引物和探针,并系统优化反应条件,构建可同时检测内参基因与CC-2转化体特异性片段的双重ddPCR检测体系。验证结果表明,该方法在多种非目标转化体中未出现非特异性扩增,品系特异性良好;线性范围覆盖20~20 000 copies的CC-2基因组DNA,检出限与定量限分别低至10 copies和20 copies。盲样测试中,不同转化体含量的测定结果重复性好、准确度高,检测性能符合国内外转基因成分定量检测标准的要求。本研究建立的ddPCR方法可为转基因玉米CC-2的商业化种植及其产品监管提供可靠的技术支撑。

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