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人工设计短肽PF1和PF2的克隆表达及其对葡萄糖氧化酶活性的影响
来源:食品科学网 阅读量: 123 发表时间: 2023-01-03
作者: 李传博,鲁明杰,张庆芳,林禹彤,窦少华
关键词: 葡萄糖氧化酶;带电荷短肽;克隆表达
摘要:

人工设计并合成2 条等电点分别为12.01和3.18的短肽PF1、PF2,基因全长均为309 bp。以PF1-F、PF1-R、PF2-F和PF2-R为引物,扩增至pET-30a(+)载体中进行克隆表达。经Ni-NTA分离纯化得到纯蛋白。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳与Western Blot分析表明:表达出的目的蛋白与预期估算大小一致。纯化后的短肽加入葡萄糖氧化酶(glucose oxidase,GOD)催化作用体系中,表明纯化后的短肽分别使GOD活力提高8.34%和降低6.88%。因此可以说明,人工设计的不同电短肽PF1、PF2可以促进或抑制GOD的催化作用,进一步拓宽GOD在食品发酵和食品保鲜方面的应用范围。

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