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酿酒酵母APA1的定点突变以及与增强型绿色荧光蛋白EGFP基因的共表达
来源:食品科学网 阅读量: 116 发表时间: 2017-06-07
作者: 马 涛,姚明月,刘延琳
关键词: 载体构建;酿酒酵母;同义突变
摘要:

应用基因突变技术向酿酒酵母APA1基因中引入同义突变,为进一步研究APA1表达量与酿酒酵母硫化氢产量的关系提供实验基础。从酿酒酵母S288c中利用聚合酶链式反应扩增APA1基因,与EGFP基因融合构建表达载体。以该载体为模板,通过一步法点突变技术向APA1基因中分别引入APA1-1/2/3/4 4 个突变。测序结果表明突变位点与预期结果一致。成功获得了APA1的4 个同义突变。一步法点突变技术是一种高效的定点突变方法。分别转化酿酒酵母YS59,荧光显微镜下可见绿色激发荧光,表明APA1-1/2/3/4与EGFP基因共表达。

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