目的:建立AB-8大孔树脂纯化稠李花色苷的方法,并检测稠李花色苷体外抗氧化活性。方法:通过AB-8大孔树脂对稠李花色苷的动态吸附与解吸条件优化,确定最佳纯化条件;采用四唑氮蓝(nitroblue tetrazolium,NBT)光化还原法测定花色苷体外抗氧化活性,2’,7’-二氢二氯荧光素二乙酸酯(2’,7’-dichlorodihydrofluorescein diacetate,DCFH-DA)法观察花色苷对H2O2诱导的N2A细胞氧化损伤的保护作用。结果:稠李花色苷的最佳动态纯化条件是:吸附流速0.01 mL/s,粗提液质量浓度8 mg/mL,过柱次数2 次;解吸剂乙醇体积分数70%,流速0.01 mL/s,pH 3,纯化之后稠李花色苷的色价为57.1,纯化了16.31 倍;NBT实验结果表明,稠李花色苷具有清除超氧阴离子自由基的能力,且具有较好的剂量-效应关系;0.025 mg/mL的稠李花色苷能够保护H2O2损伤的N2A细胞,0.05 mg/mL的稠李花色苷能够降低细胞内活性氧水平。结论:AB-8大孔树脂是纯化稠李花色苷的一种有效方法,稠李花色苷在一定质量浓度范围内具有较好的体外抗氧化活性。
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