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中国热带农业科学院盛占武研究员等:蛋白质-多酚-淀粉三元体系的相互作用及其对各组分功能
2023-09-09 11:22:18 521
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在食品领域中,常运用食品中各组分之间的相互作用来调节其感官性状与功能特性。蛋白质、多酚类化合物与淀粉三者在食品体系中普遍存在,均在食品体系中发挥着关键作用,其构成的三元体系中常伴随复杂的反应,三者间的相互作用通常可赋予食品优良性状并产生一定的功能效应,掌握其相互作用机理对于构建三元食品体系及拓展其应用具有重要意义,三者的相互作用对于抗性淀粉的开发改性、乳液传递系统的构建、纳米颗粒复合物的制备都存在积极作用。

中国热带农业科学院海口实验站田子昂,郑丽丽、盛占武*等通过论述蛋白质-多酚-淀粉构成的三元体系中各组分之间的相互作用,对各组分功能的影响和应用,为相关食品企业提供思路。

1 三元体系中两两组分间的相互作用

1.1 蛋白质与多酚间的相互作用

蛋白质与多酚的相互作用如图1所示。非共价作用主要为疏水相互作用、氢键以及静电作用,多酚具有较多羟基,会通过氢键与多肽的极性基团发生相互作用,而含疏水取代基的多酚则通过疏水相互作用与蛋白质结合,此外,极性较低的甲基化多酚可以渗透到蛋白质的疏水区域与其发生相互作用。一般认为非共价作用占主导的驱动力是疏水相互作用。此外,蛋白质与多酚复合的过程中还存在静电力与范德华力等较弱的非共价作用,一般起到稳定与辅助作用。

相比之下,蛋白质与多酚之间更易发生共价作用,酚类化合物活性较强,容易发生氧化反应生成醌类物质,醌可与蛋白质的部分游离氨基等发生迈克尔加成反应形成共价键,或酚裂解成的碳正离子与外源性的多肽链发生交联反应;此外也存在由自由基介导多酚-蛋白质共价复合物形成的过程。多酚的羟基和芳香环的数量决定了与蛋白质共价相互作用的程度。值得注意的是,同种物质存在于不同环境下可能会发生不同方式的结合,如绿原酸与牛血清白蛋白等在酸性条件下以非共价形式结合,而在碱性条件下会转变为共价结合方式。

1.2 蛋白质与淀粉间的相互作用

淀粉与蛋白质之间的相互作用一般会发生于分子的不同片段或侧链间,非共价结合是两者之间最常见的相互作用类型,包括疏水相互作用、氢键、静电力、范德华力等。氢键由负电荷原子对氢原子的静电吸引形成,由于淀粉中存在丰富的-OH基团,因此在混合的淀粉-蛋白质基质中,氢键是最突出的亲水相互作用。静电相互作用则主要发生在淀粉上的阴离子基团和蛋白质上的正电荷基团之间。通常情况下,存在多种相互作用并存的现象,占主导的作用力由淀粉组成和结构决定。蛋白质与淀粉主要的作用方式如图2所示。


共价相互作用可表现为大分子上特定反应基团之间强化学键的相互作用。例如,酶结合、化学交联和美拉德反应,美拉德反应是在多糖和蛋白质之间形成共价键的常见方式。共价键可以发生在淀粉分子上的末端羰基还原基团和蛋白质上的氨基之间,这种作用受温度和时间、pH值和湿度等条件影响。

1.3 多酚与淀粉间的相互作用

淀粉与多酚都含有较多羟基,淀粉与多酚的相互作用包括氢键、静电相互作用、疏水相互作用和离子键等非共价作用,且其相互作用的强弱程度受其结构特征和物理化学参数等影响。在分子水平上,各种多酚和淀粉之间的相互作用可以产生两种类型的复合物:一种类型是V型络合物,结构如图3所示,;另一种是非包合复合物。此外,多酚因可以与消化淀粉相关的酶发生作用,产生竞争性或非竞争性抑制,从而可以调节淀粉的水解。

2 相互作用对组分功能性质的影响

2.1 对淀粉功能性质的影响

对淀粉功能性质的影响主要体现在对其消化性的改变上,消化是淀粉发挥功能的重要一环。一般认为长期摄入大量的快消化淀粉会给人体健康带来风险,增加罹患代谢疾病的可能性。多酚对淀粉消化作用的抑制作用是由于新的结晶结构的形成与非竞争性抑制作用。多酚与淀粉会发生相互作用形成V型络合物,也可以与消化淀粉的酶作用,这也归结于蛋白质与多酚的相互作用。此外,直链淀粉回生的趋势会导致不稳定的淀粉-多酚V型络合物,从而可能释放多酚化合物以抑制α-淀粉酶的活力或竞争性抑制葡萄糖转运蛋白活性。

在淀粉糊化方面,蛋白质具有延缓淀粉糊化、调节直链淀粉和支链淀粉回生过程的作用。蛋白质能附着在淀粉周围通过物理作用阻碍淀粉与溶剂的作用,调节淀粉颗粒的膨胀和溶解,此外,也有研究表明蛋白质会影响淀粉的糊化黏度,因为两者形成的交联网络可保护淀粉颗粒的完整性,使其不易被剪切破坏。

2.2 对多酚功能特性的影响

多酚功能的有效发挥需要其通过消化道有效运输到靶组织,故其效能受多种因素的影响,研究证实多酚如果能在肠道中缓慢释放可提高其生物利用率。此外,因淀粉-多酚复合物对消化酶具有抗性,该复合物被认为是与淀粉-脂质复合物类似的抗性淀粉,这种抗性是由多酚对消化酶的抑制和复合物中形成的淀粉的单螺旋引起的。且该复合物可能和不含多酚的传统抗性淀粉在益生元活性中起协同作用,是一种很有前景的益生元成分。

蛋白质可通过与多酚产生相互作用而影响多酚性能,如通过产生蛋白质-多酚复合物减少食品体系中游离多酚的比例,且蛋白质会通过物理性阻碍作用减缓多酚的氧化降解,更重要的是,在人体内的消化吸收的过程,这种物理屏障可以更好地保护多酚,使其通过胃与上消化道时免受降解,从而更好地发挥其功效,且有研究表明多酚与蛋白的复合物可以增加肠道中完整多酚的浓度,从而提高其生物利用性和稳定性。

2.3 对蛋白质功能特性的影响

多酚与蛋白质的相互作用会改变蛋白质结构,进而影响蛋白质的两亲性、稳定性,食品工业中常利用这种作用改善蛋白质的功能性质,提高产品性能。极性多酚会通过修饰蛋白质,增加蛋白质疏水性,减弱其抗应变能力,从而增加其乳化能力。并且蛋白质与多酚的相互作用会通过影响必需氨基酸的生物可及性进而降低蛋白质的营养价值。通常情况下,天然蛋白质的抗氧化活性较温和,而酚类化合物具有较强的抗氧化潜力,可通过适当的修饰改善蛋白质的抗氧化功能。蛋白-多酚复合物可被认为是一种潜在的抗氧化乳化剂。将多酚添加到蛋白质溶液中时,多酚会通过疏水相互作用和氢键与蛋白质结合,可能会引起蛋白质二级结构的改变,促进蛋白质内部和非极性结构域的暴露,使更多的多酚可以结合到这些结构域。蛋白质表面上更多的疏水结合位点如酪氨酸(Tyr)、脯氨酸(Pro)、组氨酸(His)和色氨酸(Trp)残基被暴露,这导致多酚与蛋白质的结合概率增加。此外,暴露的氨基酸残基,如Tyr、Trp和半胱氨酸(Cys),可以提高蛋白质的抗氧化性能。故蛋白质-多酚复合物的形成对改善食品的功能性质也有裨益,

3 三元体系的相互作用及应用

3.1 三元体系的相互作用

蛋白质、多酚与淀粉间存在不同程度的非共价相互作用,这些相互作用会对蛋白质的结构功能、多酚的抗氧化能力与生物利用率、淀粉的消化性与糊化等功能造成影响;多酚类物质可以改善淀粉的回生和消化吸收性能,也可以被淀粉包裹后递送;蛋白质与多酚的结合有利于多酚的递送,可提高多酚的稳定性,也可改善蛋白质的环境敏感性。蛋白质、多酚与淀粉间的相互作用及其部分功能影响如表1所示。

例如,葡萄酒在运输或贮存过程会产生浑浊,一般被认为是蛋白质和多酚之间的相互作用,使体系中形成可见的聚集物。而多糖的加入可以抑制浑浊产生,其可能有两种机制:多糖通过非共价键与多酚相互作用占据多酚上的蛋白质结合位点,阻止蛋白质与多酚结合,或与蛋白质、多酚形成三元复合物,增加复合物的溶解度,抑制聚集,其机理取决于多糖的离子特性和结构特性,以及多酚的聚合度。

此外,仅由蛋白质制备的单一体系乳液易发生聚结、乳化和相分离,而使用涂有多糖的蛋白质作为乳化剂可增强体系稳定性。然而这种二元体系也存在缺陷,液滴尺寸减小会导致与氧、离子和自由基接触面积的增加,导致封装材料的降解,涂有低分子质量糖类的蛋白质可能具有更高的抗氧化活性,但是随着糖类分子质量的增加,它们的抗氧化能力会降低。所以多酚的加入可以弥补这一不足,利用三者的相互作用可以完成功能性的拓展。具体而言,在基于蛋白质的递送系统中,蛋白质可能在等电点附近大量沉淀,而多糖的参与会提供空间位阻来抑制蛋白质的聚集。同时,许多生物活性物质如多酚的存在,可以起到加速蛋白质沉淀的作用,因此蛋白质-多糖复合物可以减少蛋白质和多酚的共沉淀。

纳米颗粒与三元体系之间也有一定的相互作用,当纳米颗粒进入食品或生物体内,在接触食品组分或生物体液的瞬间就会和周边的蛋白质、多糖等物质形成生物冠,会改变纳米颗粒的表面性质、聚集态和生物学效应,纳米颗粒与生物冠相互影响,可在蛋白-多酚纳米颗粒二元体系的基础上,引入淀粉可制备淀粉冠,也可在淀粉-多酚纳米颗粒的基础上制备蛋白冠。

3.2 三元体系的应用

1 )乳液递送体系

乳液递送体系在改善食品质量、安全性、营养成分和感官属性方面备受关注,乳液可通过包封生物活性物质结合到食品中。但通常情况下,由单一生物分子构建的乳液体系的功能性存在缺陷,且稳定性也有待提升,可使用其他生物分子的修饰来赋予其独特的功能性质或者提高其理化稳定性。
2) 纳米颗粒复合物
可生物降解纳米递送系统(NDS)在药品、食品开发中的作用也备受关注。纳米颗粒由于其具备体积小、反应活性高等优点,在食品和医学领域引起了广泛关注,如食品级二氧化钛颗粒常用于食品工业,作为增白和增亮添加剂,特别是在一些糖果、乳制品、粉末状产品中,生物冠形成主要涉及静电相互作用、氢键和疏水效应等,且会影响纳米递送系统的功能性。此外,淀粉基纳米颗粒(SNPs)也可以通过负载其他生物分子来改变复合物的理化性,可以通过调整SNPs的尺寸和性质来构建具有各种生物实体的复合物,从而改善它们的功能性质,且SNPs还可用于增强疏水物质的溶解度并改善生物活性物质的营养特性。
3) 生物冠
目前关于生物冠的研究以蛋白冠居多。由于纳米颗粒具有比较大的比表面积,故在与生物相关液体接触后其表面会迅速吸附蛋白质,形成蛋白冠。蛋白冠的形成对人体健康具有潜在影响,一般会对人体的消化吸收产生负面影响。在给药系统中,蛋白冠可以覆盖靶向配体,阻碍它们与靶向受体的相互作用。纳米递送系统含有很高的表面自由能,这使得它们非常不稳定。此外,在肽负载NDS的口服给药系统中,还观察到酶降解、pH值的剧烈变化、非特异性结合和到达靶位之前的快速渗漏。故使用其他生物分子与蛋白质联用,探究纳米颗粒与其他生物分子形成的复合物在食品领域具有前景,也有助于纳米材料的有效功能设计。研究表明,在NDS制备过程中,蛋白质与多糖会发生静电相互作用,可以增加两个大分子间的空间和静电排斥力,从而提高封装剂和NDS的稳定性。生物大分子之间的静电力会降低表面自由能,另外,用带相反电荷的大分子进行冠修饰是提高胃给药用纳米药物稳定性和控释的有效方法,称为核-壳-冠(CSC)NDS,是以蛋白质形成核心(内吸附层),多糖形成外层(冠状),外层提供额外的空间稳定性和静电稳定性,而核心可以改变整体颗粒密度并保证活性成分的持续释放。此外,生物活性分子与纳米颗粒的相互作用也有积极作用。
综上所述,纳米颗粒与生物分子的并用对纳米颗粒与生物分子的功能改善存在积极作用,对功能性食品的开发也有重要启示,而蛋白质、淀粉、多酚都是可选择的适宜材料,由其构成的三元体系与纳米颗粒的联用亦有研究前景。

4 结 语

由蛋白质-多酚-淀粉构成的三元食品体系具有一定研究前景,目前相关研究多集中于两两组分之间的相互作用,但三者的相互作用亦会显著影响各自的结构与功能特性,可以利用这种相互作用完善食品体系的功能性质。抗性淀粉对于调节血糖、防治慢性病具有积极意义,受到人们关注,且蛋白质与多酚类化合物都与淀粉的消化性相关,可调节淀粉的抗消化性,同时赋予其抗氧化性等功能特性,但三元体系中三者间会发生许多相互作用,可能存在协同或拮抗作用,也包括了二元复合物与组分间的相互影响,这种功能的调节有待进一步深化。纳米颗粒在食品领域的应用有待拓展,深入研究生物分子与食物基质或胃肠道中的纳米颗粒的相互作用,可为探究食品中生物冠的形成与其实际应用提供理论依据,并促进对无机食品级纳米颗粒在胃肠道中消化和作用的理解。深入探究蛋白质-多酚类化合物-淀粉三元体系复合物的结构和理化性质及其功能影响,可为精细调控三元复合食品的功能提供理论支撑。

本文《蛋白质-多酚-淀粉三元体系的相互作用及其对各组分功能影响的研究进展》来源于《食品科学》2023年44卷11期348-355页. 作者:田子昂, 郑丽丽, 艾斌凌、杨旸,郑晓燕,校导,王申宛,盛占武. DOI:10.7506/spkx1002-6630-20220506-059.

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