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—— 中国食品杂志社
采用木瓜蛋白酶和糜蛋白酶双酶联合水解坛紫菜蛋白（Porphyra haitanensis protein，PHP）制备降血压活性肽，测定了经超滤后各个分子质量PHP酶解液清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH）自由基和2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)（2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)，ABTS）阳离子自由基能力、铁离子还原抗氧化能力（ferric ion reducing antioxidant power，FRAP）以及血管紧张素转化酶（angiotensin converting enzyme，ACE）抑制活性。经质谱鉴定和活性肽数据库BIOPEP以及AHTPDB网站查找筛选活性肽，采用分子对接解释多肽抑制ACE机理，并对双酶酶解PHP动力学进行研究。结果表明：经超滤后的8 个分子质量的坛紫菜多肽组分中，＜0.5 kDa的组分具有最高DPPH自由基和ABTS阳离子自由基清除能力，＜1 kDa的组分具有最高FRAP值，而0.5～1 kDa组分IC50值（（2.21±0.28）mg/mL）最低。经查找筛选出14 条降血压肽，其中4 条肽的序列和对接能量分别为AVP（－5.87 kJ/mol）、GPL（－6.13 kJ/mol）、LDY（－7.65 kJ/mol）和LGYL（－7.78 kJ/mol）。酶解动力学模型预测PHP水解度与实验水解度相对误差在10%以下。本实验基于串联质谱与分子对接技术，通过生物信息筛选和体外活性检测从混合多肽中快速鉴定、筛选活性多肽，探究多肽抑制ACE的机理，并建立了描述蛋白可控酶解过程规律的动力学模型，为活性肽的制备提供了参考和借鉴。
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