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—— 中国食品杂志社
本文探讨了利用了(NH4)2SO4分级沉淀、透析脱盐及Q-SepharoseFF层析分离纯化酪蛋白的胃蛋白酶水解物中的CGMP的工艺。结果表明:采用60%饱和度的(NH4)2SO4盐析,可从上清液中直接回收高纯度CGMP,得率为0.71%。低饱和度的(NH4)2SO4可有效脱除杂蛋白。脱盐粗提物CGMPQ-SepharoseFF层析条件为:pH8.5、20mmol/LTris缓冲液平衡上样,用含0.3mol/LNaCl、20mmol、pH7.1的Tris缓冲液洗脱;浓缩物最大上样量为34.2mg蛋白/ml树脂。利用优化的工艺对水解液层析纯化,纯化产物得率约为2.19%(以酪蛋白计),总结合态唾液酸回收率为87.4%(以酶解液中的唾液酸计),糖基化度可提高到0.472以上。整个工艺路线简便、快捷、成本较低,适合工业化生产。
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